怎样选择符合的酶标板?
酶标板品种单一,各人每每不晓得该怎样选择?怎样选择?明天,小编跟各人一同来学习下酶标板的选择本领!
一:依据酶标板底部的差别,可以分为平底、U型底、V型底
平底的折射率低,适于在酶标仪检测;U型底的酶标板折射率较高,利便加样、吸样、混匀等操纵,可以不必放在酶标仪上,间接经过目测察看颜色变革状况,从而判断有无响应的免疫反响。V底的酶标板可以的汲取样品。
二:依据酶标板与卵白和别的分子联合才能的差别,分为高联合力、中联合力和氨基化
高联合力:外表经处置后,其卵白联合才能大大加强,可达300~400ngIgG/cm2,次要联合的卵白分子量>10kD。利用该类酶标板可进步敏理性,并可绝对增加包被卵白的浓度和用量,不敷之处为较易发生非特异性反响。抗原或抗体包被后,以非离子去污剂无法无效地关闭未联合卵白的部位,需利用卵白作为关闭剂。
中联合力:经外表疏水键主动与卵白联合,合适作为分子量>20kD的大分子卵白的固相载体,其卵白联合才能为200~300ng IgG/cm2。由于该类酶标板所具有的仅与大分子联合的特征,实用于作为未纯化抗体或抗原的固相载体,可低落潜伏的非特异性交织反响。该类板可以惰性卵白或非离子去污剂作为关闭液。
氨基化:经外表改性处置后拥有带正电荷的氨基,其疏水键由亲水键代替。该类酶标板合适作为小分子卵白的固相载体。利用符合的缓冲液和pH值,其外表可经过离子键与带负电荷的小分子联合。由于其外表的亲水特征和可经过别的交联剂共价联合的才能,可用于牢固溶于Triton-100、Tween 20等去污剂的卵白分子。该类板的缺陷为由于低落了疏水性,一局部卵白分子无法联合;别的,其外表需无效地关闭。由于亲水和共价的外表特征,利用的关闭液必需可以与非反响性氨基基团和所选择的交联剂中任何功效基团产生作用。
三:依据颜色分为通明、玄色、白色
通明的是zui常用的,用于zui一样平常的酶联免疫实行。绝对于通明的的板子,另有用于发光检测用的不通明的板子,一样平常有玄色和白色两种。玄色的酶标板本身会有光吸取,以是它的信号绝对于白色的板子要低许多,因而一样平常用于检测较强的光,如荧光检测。而白色的酶标板就用于较弱的光检测,常用于一样平常的化学发光。别的玄色的酶标板还可以消弱非特异反响带来的题目。有些客户会问,用一样平常的酶标板可不行以举行发光检测,答复是不行以的,由于一样平常从化学发光反响中发射出的光是各向异性的,也便是说各个偏向上划一发射出来的。假如用通明的板子,光不但会从垂直偏向发散,还从程度偏向发散出来。很容易的就会经过各个孔之间的间隙和孔壁。如许的话,光较强时相邻孔之间的影响就会很大,因而不克不及用通明的酶标板来举行化学发光实行。
固然,如今的酶标板另有可装配和不行装配供客户选择。